यह एक ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप है जिसमें बिना दाग वाले नमूने में प्रकाश के प्रवेश के दौरान छोटे प्रकाश विचलन, या चरण बदलाव होते हैं। ये चरण बदलाव एक छवि में तब्दील हो जाते हैं, जिसका अर्थ है कि जब प्रकाश एक अपारदर्शी नमूने से गुजरता है, तो चरण बदलाव नमूने को उज्ज्वल कर देता है, जिससे पृष्ठभूमि में एक प्रबुद्ध (उज्ज्वल) छवि बनती है।
चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी पारदर्शी नमूनों के साथ काम करते समय उच्च-विपरीत छवियां उत्पन्न करती है, इसलिए यह माइक्रोबियल संस्कृतियों, पतले ऊतक के टुकड़े, सेलुलर ऊतक और उपकोशिकीय कणों की छवियों के लिए विशेष रूप से सच है।
चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी के संचालन के पीछे सिद्धांत नमूने को एक आयाम छवि में परिवर्तित करने के लिए ऑप्टिकल तरीकों का उपयोग करना है, जिसे माइक्रोस्कोप की ऐपिस के माध्यम से देखा जाता है।
पीसीएम का उपयोग बिना दाग वाली कोशिकाओं (जिन्हें चरण वस्तुओं के रूप में भी जाना जाता है) को देखने के लिए किया जा सकता है, जिसका अर्थ है कि कोशिकाओं की आकृति विज्ञान को बनाए रखा जाता है और कोशिकाओं को उनकी प्राकृतिक अवस्था में उच्च कंट्रास्ट और प्रभावी स्पष्टता के साथ देखा जा सकता है। ऐसा इसलिए है क्योंकि यदि नमूनों को दागदार और स्थिर किया जाता है, तो वे अधिकांश कोशिकाओं को मार देंगे, एक ऐसी विशेषता जिसे ब्राइटफील्ड प्रकाश माइक्रोस्कोपी समाप्त नहीं कर सकता है।
प्रकाश प्रवेश के दौरान होने वाले बदलाव आयाम परिवर्तन में परिवर्तित हो जाते हैं, जिससे छवि विपरीत होती है।
प्रतिदीप्ति जैसे कंट्रास्ट-बढ़ाने वाले तत्वों के साथ मिलकर, वे नमूना छवियों की बेहतर प्रस्तुति की अनुमति देते हैं।
चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप के भाग
चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप का उपकरण प्रकाश स्रोत प्राप्त करने से लेकर छवि विज़ुअलाइज़ेशन तक प्रकाश पथ पर आधारित है।
इसलिए, इसके अनुक्रम में निम्न शामिल हैं:
प्रकाश स्रोत (पारा आर्क लैंप)
समूह शॉट
APERTURE
कंडेनसर
रिंग कंडेनसर
नमूना
उद्देश्य
फोटो प्लेट
केन्द्रीकृत प्रकाश
चरण वलय
चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप विशेषताएं
विक्षेपित बिखरे हुए (विक्षेपित) प्रकाश और अविभाजित प्रकाश के कारण होने वाला परिवर्तन जो नमूने तक पहुंचता है जहां इसे अवशोषित किया जाता है, एक निश्चित तरंग दैर्ध्य पर उत्पन्न होता है और रंग उत्पन्न करता है। प्रकीर्णित प्रकाश और अवशोषित प्रकाश के कारण होने वाले अंतर को आयाम परिवर्तन कहा जाता है। ये आयाम परिवर्तन संवेदनशील होते हैं और इसलिए इन्हें चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी जैसे फोटोग्राफिक उपकरणों द्वारा नहीं देखा जा सकता है और इसलिए ये मानव आंखों को दिखाई देते हैं।
चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप के कंडेनसर में एक अपारदर्शी डिस्क होती है जिसे डोनट कहा जाता है, जबकि पारदर्शी डोनट प्रकाश का एक शंकु बनाता है जो नमूने से होकर गुजरता है। जैसे-जैसे प्रकाश बदलता है, नमूने पर कुछ प्रकाश ऑप्टिकल घनत्व में परिवर्तन के कारण मुड़ जाता है, जिससे उद्देश्य पर एक छवि बनती है। अनिर्धारित प्रकाश चरण प्लेट पर चरण रिंगों से टकराएगा, जबकि विक्षेपित प्रकाश चरण प्लेट से सीधे गुजरने वाले चरण रिंगों से चूक जाएगा, जिससे एक छवि बनेगी।
चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप ऐसे उद्देश्यों के साथ डिज़ाइन किए गए हैं जो प्रतिदीप्ति जैसी कंट्रास्ट-बढ़ाने वाली तकनीकों के साथ संयोजन में उपयोग किए जाने पर विभिन्न प्रकार के कार्य कर सकते हैं। उद्देश्य एक आंतरिक चरण प्लेट में स्थित है, जो इसके प्रकाश अवशोषण और चरण बदलाव (यानी, अविवर्तित) को बदलता है, नमूने के विपरीत एक व्यापक स्पेक्ट्रम बनाता है और पृष्ठभूमि में मजबूत कंट्रास्ट बनाता है।
चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी के अनुप्रयोग
जीवित कोशिकाओं, जैसे पशु और पौधों की कोशिकाओं की आकृति विज्ञान का निर्धारण करें
सूक्ष्मजीवों की गतिशीलता और गति संरचना का अध्ययन करें
बैक्टीरियल एंडोस्पोर्स जैसे कुछ माइक्रोबियल तत्वों का पता लगाना
